නිෂ්පාදන

ප්‍රෝටීන් පොස්පරීකරණය විවිධ සෛලීය ක්‍රියාකාරකම් නියාමනය කරන අතර ශාකවල මුල් වර්ධනයේ ප්‍රධාන කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි.Arabidopsis බීජ පැලවල ප්‍රෝටීන් පොස්පරීකරණය පිළිබඳ පෙර පරීක්ෂණවලට අනුපූරකව සහ පුළුල් කිරීම සඳහා අපි විකල්ප ප්‍රවේශයක් භාවිතා කළෙමු, එය denaturing නොවන තත්වයන් යටතේ ප්‍රෝටීන් නිස්සාරණය සහ Rubisco-ක්ෂය වූ හදුනාගැනීම් වල නොවෙනස්ව ඇති ෆොස්ෆොප්‍රෝටීන වල immobilized metal-ion affinity chromatography (IMAC) සුපෝෂණය සමඟ ඒකාබද්ධ කරයි. ද්විමාන ජෙල් විද්‍යුත් විච්ඡේදනය (2-DE) සහ ද්‍රව වර්ණදේහ-ටැන්ඩම් ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (LC-MS/MS) භාවිතා කිරීම.ඉන්-ජෙල් ට්‍රයිප්සින් ජීර්ණය සහ තෝරාගත් ජෙල් ලප විශ්ලේෂණය මගින් ෆොස්ෆොරයිලේටඩ් පෙප්ටයිඩ සහ අපද්‍රව්‍ය 144 ක් හඳුනාගෙන ඇති අතර, ඉන් ෆොස්ෆොපෙප්ටයිඩ 18 ක් සහ ෆොස්ෆොසයිට් 8 ක් පමණක් ෆොස්ෆාට් 4.0 සහ පී3ඩීබී ඇරබිඩොප්සිස් තලියානා ෆොස්ෆොරිලේෂන් අඩවි දත්ත සමුදාය තුළ සොයා ගන්නා ලදී.හඳුනාගත් ෆොස්ෆොප්‍රෝටීන් 82 න් අඩකට වඩා වැඩි ප්‍රමාණයක් කාබෝහයිඩ්‍රේට් පරිවෘත්තීය, ප්‍රභාසංශ්ලේෂණය/ශ්වසනය හෝ ඔක්සිකාරක ආතති ප්‍රතිචාර යාන්ත්‍රික එස්එම්එස් සඳහා සම්බන්ධ වී ඇත.2-DE සහ LC-MS/MS වලට පෙර නොවෙනස්ව පවතින ෆොස්ෆොප්‍රෝටීන් පොහොසත් කිරීම පෙප්ටයිඩ මට්ටමේ සුපෝෂණය භාවිතා කරන ක්‍රම හා සසඳන විට පොස්පරීකරණය කරන ලද ත්‍රෙයොනීන් සහ ටයිරොසීන් අවශේෂ හඳුනාගැනීම වැඩි දියුණු කරන බව පෙනේ, ප්‍රවේශයන් දෙක පොස්පරි ආවරණ අඩවි අනුව තරමක් අනුපූරක බව යෝජනා කරයි.පරිණත Arabidopsis පත්‍ර සඳහා කලින් ලබා ගත් ප්‍රතිපල සමග තරුණ බීජ පැල සඳහා ප්‍රතිඵල සසඳා බැලීමෙන් මෙම පටක වල අවකලනය ලෙස පොස්පරීකරණය වී ඇති ප්‍රෝටීන පහක් හඳුනාගෙන ඇති අතර, ශාක සංවර්ධනයේදී ප්‍රෝටීන් පොස්පරීකරණයේ ගතිකතාවයන් විමර්ශනය කිරීමේ මෙම තාක්ෂණයේ හැකියාව පෙන්නුම් කරයි.