නිෂ්පාදන

කොලිසින් E1 නාලිකා වසමේ පටල ස්ථලකය ප්‍රතිදීප්ත අනුනාද ශක්ති හුවමාරුව (FRET) මගින් අධ්‍යයනය කරන ලදී.FRET විසින් ජානමය වශයෙන් කේතනය කරන ලද ප්‍රතිදීප්ත ඇමයිනෝ අම්ලයක් (කූමරින්) පරිත්‍යාගශීලියා ලෙස සම්බන්ධ කර ගත් අතර FRET ප්‍රතිග්‍රාහකය ලෙස DABMI (4-(dimethylamino)phenylazophenyl-4'-maleimide) සමඟ සම්බන්ධ කරන ලද තෝරාගත් ලේබල් කරන ලද cysteine ​​අපද්‍රව්‍ය ඇතුළත් විය.ප්‍රතිදීප්ත කූමරින් අපද්‍රව්‍ය විකලාංග tRNA/aminoacyl-tRNA සින්තටේස් යුගලයක් හරහා ප්‍රෝටීනයට ඇතුළත් කර ඇති අතර එමඟින් කොලිසින් නාලිකා වසම තුළ ඕනෑම අඩවියකට වරණාත්මක සංස්ථාගත කිරීමට ඉඩ ලබා දේ.සෑම ප්‍රභේදයක්ම කූමරින් සංස්ථාගත කිරීම සඳහා නැවතුම් (TAG) විකෘතියක් සහ DABMI ඇමුණුම සඳහා cysteine ​​(TGT) විකෘතියක් රඳවා ඇත.ද්‍රාව්‍ය සහ පටල-බැඳි තත්ත්‍වය සඳහා FRET විශ්ලේෂණය භාවිතයෙන් හෙලිස් 1-6 තුළ අන්තර් අන්තර්ගෝලීය දුර හයක් තීරණය කරන ලදී.FRET දත්ත මගින් නාලිකා වසමේ පටල-බැඳුණු ව්‍යුහය පිළිබඳ නව අවබෝධයක් ලබා දෙමින් පටල ආශ්‍රය මත හෙලිස් 3-6 අතර අන්තර් අන්තර්ගෝලීය දුරවල විශාල වෙනස්කම් පෙන්නුම් කළේය.පොදුවේ ගත් කල, coumarin-DABMI FRET අන්තර් අන්තර්ගෝලීය කාර්යක්ෂමතාවය පටල බන්ධනය මත අඩු විය, colicin නාලිකාව සඳහා කුඩ ආකෘතිය මත ගොඩනැගීම.වත්මන් සහ කලින් ප්‍රකාශිත FRET දත්ත මත පදනම්ව නාලිකා වසමේ සංවෘත තත්වය සඳහා තාවකාලික ආකෘතියක් සංවර්ධනය කරන ලදී.ආකෘතිය යෝජනා කරන්නේ හෙලිස් 8 සහ 9 මගින් සාදන ලද මධ්‍යම ට්‍රාන්ස්මෙම්බ්‍රේන් කෙස් කටුව වටා බාහිර සෛල පැත්තේ සිට දක්ෂිණාවර්තව 1-7 හෙලිස් සහ හීලිස් 1, 6, 7 සහ 10 හි පටල අතුරු මුහුණත ආශ්‍රය කිරීම ය.