නිෂ්පාදන

ඇන්ත්‍රනිලික් අම්ලය සහ ප්‍රතිදීප්ත හඳුනාගැනීම සමඟ ව්‍යුත්පන්න කිරීම මත පදනම් වූ ග්ලයිකෝසයිල්ට්‍රාන්ස්ෆෙරේස් සඳහා නව ඉහළ ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ විශ්ලේෂණය.

β1-4 galactosyltransferase (GalT-1) සහ α2-6 sialyltransferase (ST-6) යන දෙකෙහිම ක්‍රියාකාරකම් ඉහළ ක්‍රියාකාරී ද්‍රවයකින් මැනීම සඳහා 2-aminobenzoic අම්ලයේ (2AA; anthranilic අම්ලය, AA) අද්විතීය ලේබල් කිරීමේ රසායන විද්‍යාව භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණයන් සංවර්ධනය කරන ලදී. ප්‍රතිදීප්ත හඳුනාගැනීම් සහිත වර්ණ විද්‍යාව (HPLC) (Anumula KR. 2006. ග්ලයිකොප්‍රෝටීන් කාබෝහයිඩ්‍රේටවල ඉහළ ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ විශ්ලේෂණය සඳහා ප්‍රතිදීප්ත ව්‍යුත්පන්න ක්‍රමවල දියුණුව. ගුද ජෛව රසායනය. 350:1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) සහ N-acetyllactosamine ප්‍රතිග්‍රාහක ලෙසත්, uridine diphosphate (UDP) -galactose සහ cytidine monophosphate (CMP)-N-acetylneuraminic acid (NANA) GalT-1 සහ ST-6 සඳහා පරිත්‍යාග කරන්නන් ලෙසත් භාවිතා කරන ලදී.එන්සයිම නිෂ්පාදන AA සමඟ ස්ථානගත කර ඇති අතර සාමාන්‍ය-අදියර තත්වයන් භාවිතා කරමින් TSKgel Amide 80 තීරුවේ උපස්ථර වලින් වෙන් කරන ලදී.Gal-β1-4GlcNAc සහ NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc යන සමගාමී ව්‍යුත්පන්න ප්‍රමිතීන් සමඟ සැසඳීමෙන් එන්සයිම ඒකක උච්ච ප්‍රදේශවලින් තීරණය කරන ලදී.රේඛීයතාව (කාලය සහ එන්සයිම සාන්ද්‍රණය), නිරවද්‍යතාවය (අන්තර් සහ අන්තර් විශ්ලේෂණය) සහ විශ්ලේෂණ සඳහා ප්‍රතිනිෂ්පාදනය කරන ලදී.හුදකලා කිරීමේදී සහ පවිත්‍ර කිරීමේදී එන්සයිම ක්‍රියාකාරකම් නිරීක්ෂණය කිරීම සඳහා විශ්ලේෂණය ප්‍රයෝජනවත් බව සොයා ගන්නා ලදී.විශ්ලේෂණයන් ඉතා සංවේදී වූ අතර සම්ප්‍රදායික විකිරණශීලී සීනි මත පදනම් වූ මිනුම්වලට සමාන හෝ වඩා හොඳින් සිදු කරන ලදී.කාබෝහයිඩ්‍රේට් ප්‍රතිග්‍රාහකවල ලේබල් කිරීම සඳහා අඩු කිරීමේ අවසානයක් තිබේ නම්, විශ්ලේෂණ ආකෘතිය වෙනත් මාරුවීම්වල ක්‍රියාකාරිත්වය මැනීම සඳහා ද භාවිතා කළ හැක.ග්ලයිකොප්‍රෝටීන් ප්‍රතිග්‍රාහක සඳහා විශ්ලේෂණයක් IgG භාවිතයෙන් සංවර්ධනය කරන ලදී.IgG glycans (biantennary G0, G1, G2, mono- සහ disialylated) වෙන් කිරීම සඳහා කෙටි HPLC පැතිකඩ ක්‍රමයක් සකස් කරන ලද අතර එමඟින් GalT-1 සහ ST-6 ක්‍රියාකාරකම් වේගවත් ලෙස තීරණය කිරීමට පහසුකම් සපයන ලදී.තවද, මෙම පැතිකඩකරණ ක්‍රමය සායනික සැකසුම් වලදී IgG ග්ලයිකන් වල වෙනස්කම් නිරීක්ෂණය කිරීම සඳහා ප්‍රයෝජනවත් විය යුතුය.