ONPG CAS:369-07-3 98.0% Min White සිට Off -White Powder
| නාමාවලි අංකය | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| නිෂ්පාදන නාමය | ONPG(2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside) |
| අණුක සූත්රය | C12H15NO8 |
| අණුක බර | 301.25 කි |
| ගබඩා විස්තර | 2 සිට 8 ° C |
| එකඟ වූ ගාස්තු කේතය | 29400000 |
නිෂ්පාදන පිරිවිතර
| සංශුද්ධතාවය (HPLC) | අවම98.0% |
| පෙනුම | සුදු සිට අක්රිය - සුදු කුඩු |
| විසඳුමක්(ජලයේ 1%) | පැහැදිලි, අවර්ණ සිට තරමක් කහ දක්වා ද්‍රාවණය |
| ජල අන්තර්ගතය(කාල් ෆිෂර්) | උපරිම.0.5% |
| විශේෂිත දෘශ්‍ය භ්‍රමණය [α]D20(c=1, H2O) | - 65.0 ° C සිට -73.0 ° C |
ONPG පරීක්ෂණය පිළිබඳ සාකච්ඡාව (β-galactosidase පරීක්ෂණය)
මෑතකදී ප්‍රශ්න නිතර මතු වී ඇත: 1. ලැක්ටෝස් පැසවීම ප්‍රමාද වීම වෙන්කර හඳුනා ගැනීමට ONPG පරීක්ෂණය භාවිතා කළ හැක්කේ ඇයි?2. ONPG පරීක්ෂණය සඳහා 3% සෝඩියම් ක්ලෝරයිඩ් ට්‍රයිසැකරයිඩ් යකඩ (හෝ ට්‍රයිසැකරයිඩ යකඩ) භාවිතා කිරීම අවශ්‍ය බව ජාතික ප්‍රමිතියේ සඳහන් වන්නේ ඇයි?3. Vibrio parahaemolyticus සඳහා, OPNG පරීක්ෂණය සිදු කරන විට, ප්‍රමිතියට අනුව ටොලුයින් පහතට එකතු කළ යුත්තේ ඇයි?කාර්යය කුමක්ද?
අපගේ සමාගම බොහෝ තොරතුරු සමාලෝචනය කර, එය සාරාංශ කර, පහත ඔබ සමඟ බෙදාගෙන ඇත:
මූලධර්මය: ONPG හි චීන නම o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside වේ.ONPG β-ග්ලැක්ටොසිඩේස් මගින් ග්ලැක්ටෝස් සහ කහ o-නයිට්‍රොෆෙනෝල් (ONP) බවට ජල විච්ඡේදනය කළ හැක, එබැවින් β-ග්ලැක්ටොසිඩේස් ක්‍රියාකාරිත්වය සංස්කෘතික මාධ්‍යයේ වර්ණ වෙනස් කිරීම මගින් හඳුනාගත හැක.
ලැක්ටෝස් යනු බොහෝ ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් හඳුනා ගැනීමට අවශ්‍ය සීනි වර්ගයකි.එහි පරිවෘත්තීය සඳහා එන්සයිම දෙකක් අවශ්‍ය වේ, එකක් සෛල විනිවිද යාම, ලැක්ටෝස් විනිවිද යාමේ ක්‍රියාකාරිත්වය යටතේ සෛල වලට ඇතුල් වේ;අනෙක β-ග්ලැක්ටොසිඩේස් වන අතර එය ලැක්ටෝස් ග්ලැක්ටෝස් බවට ජල විච්ඡේදනය කරයි.ලැක්ටෝස් සහ ග්ලූකෝස්.β-Galactosidase ONPG මත සෘජුවම ක්‍රියා කර එය ග්ලැක්ටෝස් සහ කහ o-නයිට්‍රොෆෙනෝල් (ONP) බවට ජල විච්ඡේදනය කරයි.ලැක්ටෝස් ප්‍රමාද වූ පැසවීම සමඟ පවා පැය 24 කින් එය කළ හැකිය.එම නිසා, එය agar slant සිට සංස්කෘතිය 1 තෝරා එය 1-3h සහ පැය 24 සඳහා 36 ° C දී පූර්ණ කවයක් එන්නත් කිරීමේ නිරීක්ෂණ ප්රතිඵල පැහැදිලි කරයි.β-galactosidase නිපදවන්නේ නම්, එය පැය 1-3 කින් කහ පැහැයට හැරේ, එවැනි එන්සයිමයක් නොමැති නම්, එය පැය 24 කින් වර්ණය වෙනස් නොවේ.
ඉහත එන්සයිම දෙකට අනුව, ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් පහත සඳහන් කාණ්ඩවලට බෙදිය හැකිය:
1 ලැක්ටෝස් පැසවීම (පැය 18-24) permease සහ β-galactosidase P + G + සමඟ බැක්ටීරියා;
2 ප්‍රමාද වූ ලැක්ටෝස් පැසවීම (පැය 24කට වඩා වැඩි කාලයක් ගත වීම) විනිවිද යාමක් නොමැති නමුත් ගැලැක්ටෝසයිඩේස් තිබීම: P- G+.
3 permease සහ galactosidase යන දෙකම නොමැති ලැක්ටෝස් නොවන පැසවීම: P- G-.
ONPG පරීක්ෂණය ලැක්ටෝස්-ලැග්-පැසවීම බැක්ටීරියා (P-G+) පැසවීම නොවන ලැක්ටෝස් බැක්ටීරියා (PG-) වලින් වෙන්කර හඳුනා ගැනීමට භාවිතා කළ හැක:
1 ප්‍රමාද ලැක්ටෝස් පැසවීම (P- G+) ලැක්ටෝස් නොවන පැසවීම (P- G-) වලින් වෙන්කර හඳුනා ගන්න.
(අ) සැල්මොනෙල්ලා (-) සිට Citrobacter (+) සහ සැල්මොනෙල්ලා arizonae (+).
(ආ) Escherichia coli (+) Shigella sonnei වෙතින් (-).
3% සෝඩියම් ක්ලෝරයිඩ් ෆෙරික් ට්‍රයිසැකරයිඩ (යකඩ ට්‍රයිසැකරයිඩ) මත එක රැයකින් සංස්කෘතියක් භාවිතයෙන් ONPG විශ්ලේෂණය සිදු කළේ ඇයි?අපගේ සමාගම බොහෝ තොරතුරු විමසා ඇත, නමුත් පැහැදිලි ප්රකාශයක් නොමැත.FDA වෙබ් අඩවියේ පමණක්, එය ලියා ඇත්තේ "ඉන්කියුලේට් සංස්කෘතීන් ත්‍රිත්ව සීනි යකඩ ආගාර් බෑවුම් මතට පරීක්ෂා කළ යුතු අතර 37 ° C (හෝ අවශ්‍ය නම් වෙනත් සුදුසු උෂ්ණත්වයකදී) පැය 18 ක් සඳහා පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කළ යුතු බවයි. පෝෂක (හෝ වෙනත්) agar slants අඩංගු 1.0 % ලැක්ටෝස් ද භාවිතා කළ හැකිය."එනම්: පරීක්ෂණ බැක්ටීරියා ට්‍රයිසැකරයිඩ යකඩ මාධ්‍ය මත එන්නත් කර පැය 18ක් සඳහා 37°C දී වගා කරන ලදී.1% ලැක්ටෝස් අඩංගු පෝෂක agar slants (හෝ වෙනත්) මාධ්‍යයක් ද පිළිගත හැකිය.එබැවින් ට්‍රයිසැකරයිඩ් යකඩ මාධ්‍යයේ ලැක්ටෝස් අඩංගු බව අනුමාන කෙරේ.එක රැයකින් වර්ධනය වීමෙන් පසුව, බැක්ටීරියාව හොඳ ක්රියාකාරී β-galactosidase නිපදවා ඇත.එවැනි බැක්ටීරියා භාවිතා කිරීමෙන්, ONPG β-galactosidase මගින් වේගයෙන් දිරාපත් විය හැක.පර්යේෂණාත්මක සංසිද්ධිය වේගවත් හා වඩා හොඳින් විදහා දක්වයි.මීට අමතරව, ටොලුයින් බිංදු එකතු කිරීම සහ මිනිත්තු 5 ක් සඳහා ජල ස්නානය කිරීම β-ග්ලැක්ටොසිඩේස් සම්පූර්ණයෙන්ම මුදා හැරීම සඳහා වේ.
