නිෂ්පාදන

ට්‍රිස් ඇසිටේට් ලුණු TAE (Tris-acetate-EDTA) බෆරය සැකසීමේදී නිතර භාවිතා වන අතර එය ධාවන බෆරයක් ලෙස සහ ඇගරෝස් ජෙල් වල භාවිතා වේ.ට්‍රිස් ඇසිටේට්-ඊඩීටීඒ බෆරය DNA ඇගරෝස් ජෙල් විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සඳහා භාවිතා කරන නමුත් RNA ඇගරෝස් ජෙල් විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සඳහා ද භාවිතා වේ.ද්විත්ව කෙඳි සහිත DNA අනෙකුත් බෆරවලට වඩා TAE හි වේගයෙන් ක්‍රියා කිරීමට නැඹුරු වන අතර දිගු කරන ලද විද්‍යුත් විච්ඡේදනය අතරතුරදී වෙහෙසට පත් විය හැක.විස්තීරණ විද්‍යුත් විච්ඡේදනය අතරතුර බෆර සංසරණය හෝ බෆරය ප්‍රතිස්ථාපනය කිරීම අඩු බෆරින් ධාරිතාවයට පිළියම් යෙදිය හැක.ද්රාවණය තුළ DNA වල සංචලනය අධ්යයනය කිරීම සඳහා විවිධ සාන්ද්රණයන්හිදී භාවිතා කළ හැක.TBE බෆරයේ බෝරේට් (Tris-Borate-EDTA බෆරය, 10X පවුඩර් පැකේජය, sc-296651) බොහෝ එන්සයිම සඳහා ප්‍රබල නිෂේධනයක් වන බැවින්, DNA නියැදිය සඳහා එන්සයිම යෙදුම් බැලීමේදී TAE බෆරය නිර්දේශ කෙරේ.ට්‍රිස් ඇසිටේට් ලුණු ද ෆයර්ෆ්ලයි ලුසිෆෙරේස් සමඟ ATP විශ්ලේෂණයන්හි ඉහළ සංවේදීතාවයක් ඇති බෆරයකි.

භාවිත: TAE ධාවන බෆරය DNA ඇගරෝස් ජෙල් විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සඳහා බහුලව භාවිතා වන බෆරය වන අතර දේශීය RNA ඇගරෝස් ජෙල් විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සඳහා ද භාවිතා වේ.ද්විත්ව කෙඳි DNA අනෙකුත් බෆරවලට වඩා TAE හි වේගයෙන් චලනය වීමට නැඹුරු වන නමුත් දිගු ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස් තුළ බෆර අයන ක්ෂය වීම හේතුවෙන් පිහිනීමට ද අසමත් වේ.දිගු විද්යුත් විච්ඡේදනය තුළ බෆර් බයිසිකල් පැදීම හෝ බෆර හුවමාරුව අඩු බෆර ධාරිතාව සඳහා වන්දි ලබා ගත හැකිය.2 40 mM ට්‍රිස් ඇසිටේට් සහ 1 mM EDTA, pH 8.3 අඩංගු 1 mMTAE බෆරයක් ලබා ගැනීම සඳහා සාන්ද්‍රිත TAE බෆරය තනුක කරන්න.1 mMTAE බෆරයක් ඇගරෝස් ජෙල් වල සහ ධාවන බෆරයක් ලෙස භාවිතා කළ හැක.උපරිම විභේදනය සඳහා, යොදන වෝල්ටීයතාව 5V/cm (ඒකක ඉලෙක්ට්රෝඩ අතර දුර) ට වඩා අඩු වීම නිර්දේශ කෙරේ.

යෙදුම: TAE ධාවන බෆරය Chemicalbook gel හි DNA ඇගරෝස් ජෙල් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් සඳහා බහුලව භාවිතා වන බෆරය වන අතර එය RNA ඇගරෝස් ජෙල් විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සඳහා ද භාවිතා වේ.ද්විත්ව කෙඳි DNA අනෙකුත් බෆරවලට වඩා TAE හි වේගයෙන් චලනය වීමට නැඹුරු වන නමුත් දිගු ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස් තුළ බෆර අයන ක්ෂය වීම හේතුවෙන් පිහිනීමට ද අසමත් වේ.දිගු විද්යුත් විච්ඡේදනය තුළ බෆර් බයිසිකල් පැදීම හෝ බෆර හුවමාරුව අඩු බෆර ධාරිතාව සඳහා වන්දි ලබා ගත හැකිය.සාන්ද්‍රිත TAE බෆරය 40 mM ට්‍රිස් ඇසිටේට් සහ 1 mM EDTA, pH 8.3 අඩංගු 1 mMTAE බෆරයක් ලබා ගැනීම සඳහා තනුක කර ඇත.1 mMTAE බෆරයක් ඇගරෝස් ජෙල් වල සහ ධාවන බෆරයක් ලෙස භාවිතා කළ හැක.උපරිම විභේදනය සඳහා, යොදන වෝල්ටීයතාව 5V/cm (ඒකක ඉලෙක්ට්රෝඩ අතර දුර) ට වඩා අඩු වීම නිර්දේශ කෙරේ.

භාවිත: ෆයර්ෆ්ලයි ලුසිෆෙරේස් සමඟ ATP හඳුනාගැනීමේදී, මෙම නිෂ්පාදනය වඩාත් සංවේදී බෆරය වේ;ග්ලූටමේට් බන්ධන හඳුනාගැනීම.

[3H]l-ග්ලූටමික් අම්ලය ප්‍රතිග්‍රාහක නොවන ද්‍රව්‍යවලට විස්ථාපනය කළ හැකි බන්ධනය.

[3H] L-ග්ලූටමික් අම්ලය මයික්‍රොෆියුජ් නල සහ වීදුරු වලට බන්ධනය වීම බෆර හතරකින් විමර්ශනය කරන ලදී.මෙම ද්‍රව්‍යවලට පසුබිම් බන්ධනය නොසැලකිය හැකි නමුත්, Tris-HCl සහ Tris-citrate බෆරයේ කේන්ද්‍රාපසාරී හෝ චූෂණ මගින් වැඩි කරන ලදී.මෙම බන්ධනය බොහෝ සෙයින් අඩු විය හෝ ඒ වෙනුවට HEPES-KOH හෝ ට්‍රිස්-ඇසිටේට් බෆරය භාවිතා කරන විට.[3H] L-ග්ලූටමේට් මයික්‍රොෆියුජ් නල වලට බන්ධනය වීම L- මගින් නිෂේධනය කරන ලද නමුත් ග්ලූටමේට් සහ ඇස්පාර්ටේට් වල D-සමාවික නොවේ.DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic අම්ලය ද බැඳීම වළක්වන්නේ නැත.අඩු සහ මධ්‍යස්ථ නිෂේධනයක් පෙන්නුම් කළ අනෙකුත් සංයෝග නම්: N-methyl-D-aspartate, quisqualate, L-glutamic acid diethyl ester, N-methyl-L-aspartate, kainate, සහ 2-amino-4 -phosphonobutyrate.බන්ධනය වැළැක්වීය මීයන්ගේ මොළයේ පටල මගින්.ට්‍රිස්-ඇසිටේට් බෆරයේ බන්ධනය කරන විට නැවත නැවතත් ශීත කළ-දියවන ලද පටල සකස් කිරීමකින් ප්‍රෝටීන් මත යැපෙන [3H]ග්ලූටමේට් බන්ධනයක් ලබා ගන්නා ලදී.ග්ලූටමේට් බින් ඩිංග් තක්සේරුවේදී ට්‍රිස්-ඇසිටේට් හෝ HEPES -KOH බෆරය භාවිතා කළ යුතු බව නිර්දේශ කෙරේ.Tris-HCl හෝ Tris-citrate බෆරය භාවිතා කරන්නේ නම්, මයික්‍රොෆියුජ් ටියුබ් හෝ වීදුරු ෆයිබර් ෆිල්ටරවලට බන්ධනය කිරීම නිවැරදි කිරීමට සුදුසු පාලන අත්හදා බැලීමක් කළ යුතුය.