නිෂ්පාදන

DNA භෂ්ම වලට ඔක්සිකාරක හානි සාමාන්‍යයෙන් ඔක්සිකරණය වූ පියුරීන්, විශේෂයෙන් 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) සහ 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA) සෑදීමට හේතු වේ. දන්නා විකෘති තුවාලය.සාමාන්‍ය භෂ්ම හා සසඳන විට 8-oxoG තවදුරටත් ඔක්සිකරණයට පහසුවෙන් යටත් වන බැවින්, 8-oxoG ඔක්සිකරණය වූ ආකාරයක් ප්‍රතිවිරුද්ධ DNA සංස්ලේෂණයේදී පාදයක් ඇතුල් කිරීම vitro තුළ විමර්ශනය කරන ලදී.තනි 8-oxoG තුවාලයක් අඩංගු කෘතිම අච්චුවක් ප්‍රථමයෙන් විවිධ එක්-ඉලෙක්ට්‍රෝන ඔක්සිකාරක හෝ තනි ඔක්සිජන් තත්ව යටතේ ප්‍රතිකාර කරන ලද අතර පසුව Klenow fragment exo- (Kf exo-), calf thymus DNA පොලිමරේස් ඇල්ෆා (pol alpha) මගින් උත්ප්‍රේරණය කරන ලද ප්‍රාථමික දිගුවකට ලක් කරන ලදී. ) හෝ මානව DNA පොලිමරේස් බීටා (pol beta).පෙර වාර්තාවලට අනුකූලව, dAMP සහ dCMP 8-oxoG ට ප්‍රතිවිරුද්ධව DNA පොලිමරේස් තුනම සමඟින් තෝරා ඇත.සිත්ගන්නා කරුණ නම්, 8-oxoG ඔක්සිකරණය Kf exo- මගින් තුවාලයට ප්‍රතිවිරුද්ධ dAMP සහ dGMP ඇතුළු කිරීම ප්‍රේරණය කරන බව සොයා ගන්නා ලදී.තවද, pol alpha සහ pol beta මගින් DNA සංස්ලේෂණය කිරීමේදී තුවාලය අවහිරයක් සාදයි.8-oxoA-නවීකරණය කරන ලද oligonucleotide සැකිල්ල සමඟ අත්හදා බැලීම්වලින් පෙන්නුම් කරන්නේ 8-oxoA සහ ඔක්සිකරණය වූ 8-oxoA යන දෙකම Kf exo- මගින් dTMP සෘජුවම ඇතුල් කරන බවයි.IrCl62 සමඟ ඔක්සිකරණයට පෙර සහ පසු 8-oxoG අඩංගු ඔලිගොනියුක්ලියෝටයිඩවල ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂ විශ්ලේෂණය - මූලික වශයෙන් 8-oxoG අඩවියේ ඔක්සිකරණයට අනුකූල වන අතර එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ප්‍රධාන නිෂ්පාදනය ලෙස guanidinohydantoin moiety ඇතිවේ.අබාසික් ස්ථාන සෑදීම සඳහා කිසිදු සාක්ෂියක් ලබාගෙන නොමැත.මෙම ප්‍රතිඵල පෙන්නුම් කරන්නේ 8-oxoG වල ඔක්සිකරණය වූ ආකාරයක්, සමහරවිට guanidinohydantoin, DNA සංස්ලේෂණය අතරතුර dNTPs වැරදි ලෙස කියවීමට සහ වැරදි ලෙස ඇතුල් කිරීමට යොමු කළ හැකි බවයි.vivo තුළ එවැනි ක්‍රියාවලියක් සිදු වූයේ නම්, එය G-->T සහ G-->C පරිවර්තනයට තුඩු දෙන ලක්ෂ්‍ය විකෘති තුවාලයක් නියෝජනය කරයි.කෙසේ වෙතත්, 8-oxoA හි අනුරූප ඔක්සිකරණය වූ ස්වරූපය මූලික වශයෙන් Kf exo- සමඟ DNA සංශ්ලේෂණය අතරතුර T නිවැරදිව ඇතුළත් කිරීම පෙන්නුම් කරයි.