නිෂ්පාදන

fluorescein සහ fluorescein methyl ester හි Monogalactopyranosides: සංස්ලේෂණය, biotnylated β-galactosidase මගින් එන්සයිම ජල විච්ඡේදනය සහ පරිවර්තන විසරණ සංගුණකය තීරණය කිරීම

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) සහ d-glucopyranoside) සහ ඒවායේ මෙතිල් එස්ටරය (MFMG) ඇසිටොබ්‍රොමොග්ලූකෝස්/ග්ලැක්ටෝස් සහ ෆ්ලෝරසීන් මෙතිල් එස්ටරවලින් හොඳ අස්වැන්නක් ලබා දී සකස් කර ඇත.ගැලැක්ටෝ ව්‍යුත්පන්නවල එන්සයිම ජල විච්ඡේදනය (බයෝටයිනයිලේටඩ් β-ග්ලැක්ටොසිඩේස් භාවිතයෙන්) සිදු කර ඇති අතර චාලක පරාමිතීන් ගණනය කර ඇත.ජල විච්ඡේදනය අතරතුර ප්‍රතිදීප්ත තීව්‍රතාවයේ 15-20 ගුණයක වැඩි වීමක් දක්නට ලැබේ.කෙටි කාලයකදී ප්‍රතිදීප්තියේ රේඛීය වැඩි වීමක් සහ උපස්ථරයේ අඩු සාන්ද්‍රණයක් සටහන් වී ඇති අතර, මෙම සංයෝග ග්ලැක්ටොසිඩේස් සඳහා ප්‍රයෝජනවත් සහ සංවේදී පරීක්ෂණ බවට පත් කරයි.MFMG සඳහා Michaelis-Menten නියත (Km) අගයේ විශාලත්වය FMG අගයට වඩා වැඩි වන අතර එමඟින් ෆ්ලෝරෝජනික් උපස්ථරයේ ඇති විය හැකි අනුකූල වෙනසක් යෝජනා කරයි.FMG සමඟ biotinylated β-Gal සඳහා Km අගය දේශීය එන්සයිමයට වඩා අඩුය.මෙම නිරීක්ෂණය දේශීය එන්සයිමයට සාපේක්ෂව biotinylated එන්සයිමයේ ඉහළ උපස්ථර සම්බන්ධතාවයක් පෙන්නුම් කරයි.ප්‍රතිදීප්ත සහසම්බන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය භාවිතා කරමින් ෆ්ලෝරෝජනික් උපස්ථර සහ නිෂ්පාදන දෙකම සඳහා පරිවර්තන විසරණ සංගුණක මනිනු ලැබේ.3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1 පරාසය තුළ ෆ්ලෝරෝජනික් උපස්ථර සඳහා පරිවර්තන විසරණ සංගුණක සහ එන්සයිම ජල විච්ඡේදක නිෂ්පාදන සමාන ලෙස මනිනු ලැබේ.මේ අනුව උපස්ථරයේ සහ නිෂ්පාදනයේ පරිවර්තන සංචලනයේ වෙනස හේතුවෙන් එන්සයිම චාලකයේ වැඩි දියුණු වීමක් හෝ ප්‍රමාදයක් පෙනෙන්නට නැත.